| 刘清 唐蛟 曾娟 黄明亮 童建华 黄志刚.拟南芥 AtVQ29 基因的克隆与植物表达载体构建[J].,2014,14(35):6814-6817 |
| 拟南芥 AtVQ29 基因的克隆与植物表达载体构建 |
| Cloning of Arabidopsis AtVQ29 and Construction of its PlantExpression Vector |
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| DOI： |
| 中文关键词: AtVQ29 VQ 模序蛋白 基因 克隆 植物表达载体 |
| 英文关键词: AtVQ29 VQ motif protein Gene cloning Plant expression vector |
| 基金项目:国家自然科学基金项目（ 30900099）； 湖南省高校创新平台开放基金项目（ 12K060） |
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| 中文摘要: |
| 目的： VQ 模序蛋白是植物中所特有的一类具有高度保守序列的蛋白 质， 广泛参与 植物的生长发育与 逆境反应， 本研究拟克
隆拟南芥的 AtVQ29 基因 并进一步构建由组成型启动子 CaMV 35S 驱动的植物表达载体 pSN1 301 -AtVQ29。 方法： 采用 CTAB 法
提取拟南芥基因 组 DNA， 根据已报道的 AtVQ29 基因序列 设计并合成引 物， 通过 PCR 技术扩增获得拟南芥 AtVQ29 基因 ， 经 T
载体克隆后测序。 利用 生物信息学软件对序列 进行初步分析， 同 时基于基因 重组技术构建植物表达载体。 结果： 序列 分析表明已
成功克隆 AtVQ29 基因， 该基因 编码区全长为 372bp，共编码 123 个氨基酸残基， 具有保守的 VQ 模序。 并进一步构建了由组成型
启动子 CaMV 35S 驱动的 AtVQ29 基因 植物表达载体 pSN1301 -AtVQ29。 结论： 本研究所构建的 AtVQ29 基因 植物表达载体能够
在转基因 植株中过量表达 AtVQ29 基因，为后期开展基因 功能研究与 植物基因 改良奠定了 基础。 |
| 英文摘要: |
| Objectivre:VQ-motif proteins are found exclusively in plants and have a broad range of roles in plant growth,
development and defense response. The study was aimed to clone AtVQ29 and construct plant expression vector pSN1301 -AtVQ29
drived by CaMV 35S promoter.Methods:The genome DNA of Arabidopsis thaliana was extracted with CTAB method. Based on the
reported AtVQ29 sequence, primers were designed to amplify AtVQ29. After T-vector cloning and sequencing, preliminarily
bioinformatics analysis was made. Plant expression vector pSN1301 -AtVQ29 was further constructed by the method of Recombinant
DNA Technology.Results:The sequence has an open reading frame (ORF) of 372 bp long and encoded a polypeptide of 1 23 amino acids
with conserved VQ motif. Plant expression vector pSN1301 -AtVQ29 drived by CaMV 35S promoter was successfully constructed.Conclusion:The construction of plant expression vector pSN1301-AtVQ29 which can lead to the over-expression of AtVQ29 in
transgenic plants provides the foundation for identification of gene function and genetic modification of plant． |
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