文章摘要
王 青1、2 曾耀英1* 何贤辉1 肇静娴1 王 通1.SARS- CoV X4 基因转染对T 细胞 TNF- A及IL- 6 分泌的影响[J].,2006,6(5):1-4
SARS- CoV X4 基因转染对T 细胞 TNF- A及IL- 6 分泌的影响
Study on cytokine secretion of T cell after SARS- CoV X4 gene transfection
  
DOI:
中文关键词: 严重急性呼吸综合症  冠状病毒  基因转染  细胞因子  T 淋巴细胞
英文关键词: Severe acute respiratory syndrome( SARS)  Coronavirus  Gene transfection  Cytokine  T- lymphocytes
基金项目:国家重点基础研究发展规划项目( 973) 基金( NO. G1999054303) 和国家自然科学基金重点项目( NO. 30230350) 资助。
作者单位
王 青1、2 曾耀英1* 何贤辉1 肇静娴1 王 通1 暨南大学组织移植与免疫学教育部重点实验室 
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中文摘要:
      目的: 通过检测SARS- CoV X4 基因转染后T 细胞细胞因子分泌的变化, 研究SARS- CoV X4 蛋白潜在的功能及其作 用机制, 并探讨其与SARS- CoV 致病机制的关系。方法: 利用RosetteSep 分离法分离外周血T 细胞, 以Amaxa 核转染仪将pEGFP - SARS- CoV X4 真核表达载体转入T 细胞, 应用激光共聚焦显微镜观察其瞬时表达情况, 流式细胞仪检测转染效率, CBA 技术 检测T 细胞细胞因子。结果: SARS- CoV X4 基因转染后12h 得到了明显表达, 共聚焦显微镜观察到EGFP 绿色荧光表达, 流式细 胞仪检测其表达率为245; 与空载体转染组相比, SARS- CoV X4 基因转染能显著促进T 细胞IL- 6 及TNF- A的分泌。结论: SARS- CoV X4 蛋白可诱导T 细胞分泌前炎症因子IL- 6 及TNF- A, SARS- CoV X4 蛋白可能在SARS 发病机制中起重要的作用。
英文摘要:
      Objective: To explore the function of the SARS- CoV X4 protein and its role in SARS pathogenesis, by detecting the change of cytokine secretion of T cells after transfection of SARS- CoV X4 gene. Methods: T cells were transfected with pEGFP- SARS- CoV X4 expression vector by Amaxa Nucleofector , and the green fluorescence of EGFP were detected with flow cytometry and confocal microscopy; The production of cytokine were investigated by Cytometry Beads Assay. Results: The green fluorescence of EGFP could be detected by with flow cytometry, confocal microscopy; the secretion of IL- 6 and TNF- Aincreased remarkably in SARS- CoV X4 transfection group. Conclusion: SARS- CoV X4 can promote T cells to secrete preinflammatory cytokine IL- 6 and TNF- A; it may play an important role in the pathogenesis of SARS.
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